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Isabella Clara era la terza figlia (ma primogenita superstite) di Leopoldo V, arciduca d'Austria e conte del Tirolo, e di sua moglie, Claudia de' Medici.Da parte di suo padre i suoi nonni erano Carlo II, arciduca d'Austria e la principessa Maria Anna di Baviera e, da parte di sua madre, i suoi nonni erano Ferdinando I de' Medici e la principessa Cristina di Lorena.
Ferdinando I d'Asburgo
Maria d'Asburgo, o Maria d'Ungheria (Bruxelles, 15 settembre 1505 – Cigales, ... Carlo e Isabella presso la corte della zia paterna Margherita d'Asburgo a Malines.
Figlia (Segovia 1566 - Bruxelles 1633) di Filippo II e di Elisabetta di Valois, fu diretta antagonista di Enrico di Navarra nella successione al trono di Francia.Nel 1566 sposò il cugino, l'arciduca Alberto d'Asburgo, figlio di Massimiliano II, portando in dote i Paesi Bassi e la Franca Contea.
Alberto VII d'Asburgo, arciduca d'Austria (Wiener Neustadt, 15 novembre 1559 – Bruxelles, 13 luglio 1621), è stato un cardinale e arcivescovo cattolico austriaco, in seguito governatore dei Paesi Bassi spagnoli (1595-1598) e quindi principe sovrano dei Paesi Bassi meridionali (1598-1621
Isabella d'Asburgo nota anche come Isabella, o Elisabetta, d'Austria, di Castiglia, infanta di Spagna, figlia di Filippo il Bello e di Giovanna di Castiglia divenne regina consorte di Danimarca e dell'Unione di Kalmar dopo il suo matrimonio con Cristiano II.
Eleonora, insieme ai fratelli Carlo (il futuro signore d'Europa Carlo V), Isabella e Maria, crebbe presso la corte borgognona della zia paterna Margherita d'Asburgo. La corte borgognona era culturalmente a quel tempo una delle più vivaci e ricche d'Europa.
